ТРИПСИН


ТРИПСИН
ТРИПСИН, фермент, входящий в состав поджелудочного сока, описан Кюне (Kiihne) в 1867 г., относится к группе протеаз. Он расщепляет белки,протамины,пептоны и полипептиды. В наиболее чистом виде, свободном от липазы и амилазы, получен по способу Виль-штеттера (Willstatter): после обезвоживания и обезжиривания железы извлекают ферменты глицериноми удаляют лип азу и амилазу адсори-цпей па глиноземе; в растворе остается Т. с не- трипсиу 70S которым количеством амилазы; дальнейшее очищение Т. достигается адсорпцией его каолином. Получен и в форме белковых кристаллов (Nor-throp),He гарантирующих однако пи его чистоты ни химич. индивидуальности. Данные об оптимальной t° действия Т. чрезвычайно противоречивы (от 38° до 60°), что объясняется повиди-мому присутствием различных примесей. То же относится и к данным о его устойчивости. После соединения с киназой устойчивость Т. значительно снижается. При слабокислой реакции (рН около 5) устойчивость Т. наибольшая, она медленно снижается при изменении реакции до нейтральной и затем быстро падает с повышением концентрации ОН'. Присутствие белков и особенно продуктов их переваривания делает Т. более устойчивым в отношении нагревания, так что трипсин, смешанный с раствором пептона, выдерживает даже кипячение, чем можно пользоваться для нейтрализации растворов трипсина. Трипсин лучше всего действует при слабощелочной реакции, соответствующей 0,3—0,4%-пому раствору соды; наиболее благоприятным действие щелочей является при концентрации гидроксильных ионов, равной п/70п/гоо раствора; слабее Т. действует при нейтральной и слабокислой реакции; оптимум реакции сильно зависит от субстрата (см. Пищеварение); в среднем лежит при рН=от 8,0 до 8,7. Под влиянием к-тТ. быстро теряет активность: при Н' = 10-4 он не действует; 0,1%-ный раствор соляной к-ты уничтожает его действие, но связанная НС1, небольшие количества органических к-т мало вредят действию Т. Накопление продуктов реакции переваривания задерживает скорость расщепления; замедляющее действие оказывают 10%-ный раствор NaCl, сернокислый натрий, соли тяжелых металлов, а также адсорберы—животный уголь, тальк, каолин, сывороточный альбумин, сыворотка. Задерживающее действие на Т. оказывает антитрипсин, вещество, препятствующее, по мнению некоторых авторов, самоперевариваншо кишечной стенки и появляющееся в кровяной плазме при различных кахексиях в результате появления в крови ферментов аутоли-за. Антитрипсин выдерживает кратковременное кипячение. Тимол, хлороформ, толуол, фтористый натрий также немного задерживают действие Т. Пепсин в присутствии НС1 переваривает Т. Ускоряюще действуют различные соли, особенно Са и Mg, очень слабый раствор NaCl (0,05%), примесь буры, ничтожное количество цианистого калия, сок печени, а также вещества, образующиеся из ткани поджелудочной железы при лежании на воздухе или при прибавлении спирта. Т. из чистого фистульного поджелудочного сока действует лишь на пептоны, полипептиды и протамины; на неизмененные белки он действует только в присутствии энтерокиназы (см. Пищеварение), открытой Павловым и Шаповальниковым в кишечном соке и вырабатываемой, по их мнению, слизистой оболочкой тонких кишок. Вальдшмидт-Лейц (W ald-schmidt-Leitz) считает, что энтерокиназа в фор-. ме прокипазы выделяется вместе с Т. клетками поджелудочной железы и активируется в топких кишках эрепсином. Вопрос этот впрочем выяснен недостаточно; по другим авторам, действие киназы в клетках поджелудочной железы парализуется особыми вырабатываемыми в них веществами. В связи с многообразным действием Т. различные авторы предлагают употреблять для его наименования различные тер- мины, подчеркивающие то или другое его действие, напр. трипсиноген, протрипсин, недеятельный в отношении белков Т. и активируемый киназой; Вальдшмидт-Лейц ввел термин трипсин-киназа, т. е. трипсиноген, активированный киназой; Оппенгеймер (Oppenheimor) предлагает различать триптазу, чистую протеа-зу и полипептидазу и т. д. Действие Т. (трипсин-киназы) на различные белки неодинаково: наиболее легко под^ дается ее действию сырой фибрин; медленнее— вареный фибрин и куриный белок; сывороточный глобулин и сыворотка в целом расщепляв ются только после предварительного действия желудочного сока; Т. расщепляет также глю-тин, коллаген после действия на них желудочного сока; отщепляет от нуклеопротеидов ну^ клеиновые к-ты, переваривает нуклеоальбуми-ны, муцин, оболочку жировых клеток и паренхиматозные органы; оксигемоглобин расщепляется на гематин и белковое тело; Т. высших животных не переваривает хитина и кератина. В отношении действия на полипептиды Т. по-видимому можно отнести к карбоксиполипеп-тидазам, т. к. действие его связано с наличием свободной карбоксильной группы; при этом имеет значение, какой аминокислоте принадлежит эта группа. Вообще действие Т. зависит от наличия тех или других аминокислот и от порядка их расположения в полипептидной цепи, а не от длины цепи, "как считали раньше. Напр. полипептиды, имеющие в своем составе тирозин и триптофан, расщепляются Т. наиболее легко; присутствие лейцина, аланина, аспа-рагиновой и глютаминовой к-т замедляет его действие; пролин, оксипролин и гликоколл совсем не отщепляются; расщепление искусственных полипептидов происходит асимметрически.—Т. имеется у всех животных, имеющих поджелудочную железу, у зародыша он появляется в последнюю треть утробной жизни; у птиц и холоднокровных Т. изучен мало. Секреция Т., как установлено И. П. Павловым, Бейлисом, Старлингом (Bayliss, Starling) и др., кроме нервной системы регулируется гормональным путем (см. Пищеварение, Секретин). Судьба Т. в кишечнике не выяснена; от переваривания пепсином и НС1 его предохраняет желчь, осаждающая пепсин на ворсинках. Содержащийся в кале Т. можно только отчасти отнести к Т. поджелудочного сока, т. к. он может происходить за счет лейкоцитов и бактерий. Для обнаружения Т. пользуются методом сывороточных лепешек Лефлсра (Loffler): на чашечку Петри наливают сыворотку лошади, быка или верблюда слоем в 1/2 ем& и нагревают со при 70° до свертывания; на сыворотку капают испытуемый раствор фермента и оставляют стоять 24 часа при 50°; появление ямок показывает на присутствие Т. Сывороточные лепешки можно заменить лепешками из Milch-agar'a, синтетических полипептидов Абдер-гальденаили пептона Витте, la Roche и т. д.— Для количественного определения Т. существует много методов, в основе к-рых лежит определение количества белка до действия фермента и после расщепления. Наиболее пригодным является метод Вилыптеттера и Персиля (Persiel), так как он принимает во внимание степень активирования и употребление больших количеств субстрата при малом содержании трипсина. Необходимые реактивы: 1) 15 %-пый раствор желатины; 2) раствор Т.: 1—2 г поджелудочной железы растирают с небольшим количеством воды, полученную массу раяме- 70S шивают с 100 см' воды, сначала медленно, потом быстрее и немедленно фильтруют. Лучше пользоваться первыми порциями фильтрата; 3) вытяжка энтерокиназы: 5 г высушенной слизистой оболочки тонких кишок настаивают 2 часа с 250 см3 п/2о раствора NH3 при 30°; полученная вытяжка упаривается в аппарате Фост-Гейма (Faust-Heim); 4) буферный раствор: nNH3 : NH4CI в отношении 1:2; 5) растворы для титрования по способу Вальштет-тера—Вальдшмидта-Лейца.—За единицу принимают количество фермента, дающее повышение кислотности, соответствующее 2 ом3 п/воо КОН. Для определения 0,01—0,25 г высушенной железы или полученного из нее чистого препарата смешивается в колбочках с пришлифованными пробками с 0,3 см3 раствора энтерокиназы и доводится водой до 1,5 еж3 и затем нагревается !/2 часа при 37°. После доведения объема водой до 5 см3 прибавляют 2'см3 п-раствора NHj+NHjCl, затем быстро прибавляют из нагретой пипетки 5 см3 15%-ного раствора желатины, нагретого в термостате, и хорошо перемешивают. Через 20 мин. содержимое колбочки выливают в 55 си3 кипящего абсолютного спирта, ополаскивают колбочку таким же количеством спирта, доведенного до щелочной реакции натимолфталеин прибавлениемп5/КОН и титруют. Для определения Т. пригоден ряд др. методов: Грюцнера (Grutzner), Фольгарда-Л елейна (Volhard-Lohlein) и др. Т. не следует правилу Шюц-Борисова: количество переваренного белка прямо пропорционально количеству фермента и времени его действия, м. карягпна.

Большая медицинская энциклопедия. 1970.

Синонимы:

Смотреть что такое "ТРИПСИН" в других словарях:

  • ТРИПСИН — ( Тrypsinum ). Эндогенный протеолитический фермент, разрываюший пептидные связи в молекуле белка. Расщепляет также высокомолекулярные продукты распада белков, полипептиды типа пептонов, а также некоторые низкомолекулярные пептиды, содержащие… …   Словарь медицинских препаратов

  • ТРИПСИН — Trypsinum. Свойства. Получают из поджелудочной железы крупного рогатого скота. Это белый или белый с желтоватым оттенком порошок или пористая масса без запаха. Легко растворим в воде и изотоническом растворе хлорида натрия; рН 0,2 % водного раст …   Отечественные ветеринарные препараты

  • ТРИПСИН — Фермент поджелудочной железы, растворяющий белок. Словарь иностранных слов, вошедших в состав русского языка. Чудинов А.Н., 1910. трипсин (гр. thrypsis разжижение) пищеварительный фермент, синтезируемый в поджелудочной железе в виде неактивного… …   Словарь иностранных слов русского языка

  • ТРИПСИН — ТРИПСИН, пищеварительный фермент, выделяемый ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗОЙ. Выделяется в неактивной форме (чтобы не повредить ткани на пути в кишечник), затем фермент тонкой кишки преобразует его в активный трипсин. Расщепляет пептидные связи аминокислот …   Научно-технический энциклопедический словарь

  • ТРИПСИН — пищеварительный фермент, вырабатываемый в виде неактивного трипсиногена поджелудочной железой человека и животных; расщепляет белки в кишечнике …   Большой Энциклопедический словарь

  • ТРИПСИН — ТРИПСИН, трипсина, мн. нет, муж. (от греч. tripsis размалывание) (биол.). Вещество сока поджелудочной железы, переводящее белки в более простые, растворимые соединения. Толковый словарь Ушакова. Д.Н. Ушаков. 1935 1940 …   Толковый словарь Ушакова

  • ТРИПСИН — протеолитич. фермент, синтезируемый клетками поджелудочной железы в форме неактивного предшественника трипсиногена. Активирует проферменты поджелудочной железы и занимает ключевое положение в пищеварении в тонком отделе кишечника. В кристаллич.… …   Биологический энциклопедический словарь

  • трипсин — сущ., кол во синонимов: 4 • лекарство (1413) • протеаза (4) • фермент (253) • …   Словарь синонимов

  • трипсин — Один из основных пищеварительных (протеолитических) ферментов, катализирующий гидролиз пептидов и др. соединений по месту связей, в которых участвуют карбоксильные группы аргинина и лизина [http://www.dunwoodypress.com/148/PDF/Biotech Eng… …   Справочник технического переводчика

  • Трипсин — Кристаллическая структура бычьего трипсина. Трипсин  фермент класса гидролаз, расщепляющий пептиды и белки; обладает также эстеразной (гидролиз сложных эфиров) активностью. Трипсин синтезируется в …   Википедия

Книги